takara pcr试剂盒(克隆基因全长)

作者:小玉 时间:2024-06-05 阅读:2579

1. takara pcr试剂盒,克隆基因全长?

基因做表达实验必须要克隆全长 步骤:1,rna抽提(同rt) 2,逆转录,使用合成的oligo 3,p内参 4,使用根据已知序列设计的上游引物和提供下游引物做pcr,注意设计上游引物是退火温度与下游引物相差不大。 5,产物切胶回收,ta克隆测序 这个oligo和下游引物是我根据takara和bd公司的manual自己设计的,经过我的使用效果很好。具体操作参照takara的3-racemanual。你先做3-race,了解熟悉下,成功后再做5-race。5-race要买试剂盒做,较为复杂!

takara pcr试剂盒(克隆基因全长)

2. 50ul是什么意思?

一个PCR反应的总体积.不知道你买的是哪个公司的DNA聚合酶?比如promega和Takara的试剂盒就以50μl的反应体系为例说明各反应物应加的用量的.一般做50μl的反应体系对DNA进行扩增,可以满足做分子克隆的需求.

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